故事設定在由湯姆漢克斯扮演的男主角蘭登，前往羅浮宮破案的前一年，與他搭檔合作破案的則是《刺殺據點》的美麗恐怖份子阿耶萊特祖蕾爾，伊旺麥奎格將挑戰飾演握有破案關鍵的天主教總司庫。想以科學證明神確實存在的物理學家李歐納度‧威特拉，製造出人類所知最具威力的能源─「反物質」，但他在公布這項重大成果前夕遇害，不但眼珠子被挖掉，胸膛還被烙上一個神祕的印記。 蘭登發現這個印記正是遺失已久的「光明會」（Illuminati）標記，那是個全世界最古老、權力最大的魔鬼教派。而威特拉發明的「反物質」是比核彈還具殺傷力的致命能源，此時，蘭登發現「反物質」被偷走，如果他不能設法在24小時內找出幕後黑手，有史以來最致命的大爆炸將會讓全世界在一夕間毀滅，倒數計時已經開始……。